Novedades en la terapia génica

Novedosa nano partícula que imita un virus ofrece una nueva ruta a la terapia génica.
http://www.bizcommunity.com/Article/196/323/68529.html
Eric Gershon 12 Dec 2011 12:19
Traducido: Victor A. Orozco Fundación Huntington de Colombia
Investigadores de Yale han desarrollado una novedosa nano partícula con prometedoras aplicaciones en terapia génica. El avance podría conducir a nuevos tratamientos para muchas formas de cáncer, incluyendo tumores cerebrales, así como para la fibrosis quística y la enfermedad de Huntington.
El sistema que hemos desarrollado puede ser utilizado para cualquier tipo de terapia génica ", dijo W. Mark Saltzman, profesor y director de ingeniería biomédica en la Universidad de Yale e investigador principal de un artículo sobre estos hallazgos, publicados en la revista en línea Nature Materials del 04 de diciembre. Utilizando una novedosa química sintetizamos y produjimos una nueva familia de materiales polímeros que son diferentes a cualquiera de los que hayan sido usados antes. (Saltzman y co-investigador principal Zhaozhong Jiang son investigadores de la escuela Ingeniería y Ciencias Aplicadas de Yale).
La nueva partícula no viral que es altamente segura y eficiente, actúa como un virus introduciendo un gen específico en las células enfermas con el fin de matar o repararlas.
Otros agentes no virales existentes ahora tienen defectos importantes, como la ineficiencia o una carga eléctrica muy positiva que puede matar células sanas. Tratamientos virales en la terapia génica pueden ser peligrosos porque pueden causar importantes reacciones inmunes.
El equipo de Yale superó el problema de exceso de carga, haciendo sus nano partículas más hidrofóbicas, o repelentes al agua, por lo tanto siendo menos probable que formen enlaces químicos con las moléculas de agua. En concreto, el equipo incorporó de manera segura, unidades insolubles en agua dentro del polímero que genera las nanopartículas. Esto reduce la carga positiva y aumenta la estabilidad. El resultado es un mecanismo muy seguro para la entrega de genes siendo más eficiente que las opciones disponibles en el mercado. Se puede inyectar una gran cantidad de ella en los animales", dijo Saltzman. "Se produce una entrega de genes eficientes, sin ningún efecto tóxico."
El equipo de investigación probó las nanopartículas, in vitro en cultivos celulares e in vivo en un modelo de tumor en ratones. Aunque los nuevos materiales podrían ser utilizados para la terapia génica en una amplia variedad de entornos, Saltzman y sus colegas están particularmente interesados en usarlos en futuras investigaciones sobre tratamientos para los tumores cerebrales. Muchos expertos creen que la terapia génica es un método prometedor para el tratamiento de tumores cerebrales, sin embargo, la investigación anterior se ha visto limitada por la toxicidad y la baja eficiencia de los materiales de entrega del gen. Este nuevo trabajo ofrece una posible solución a estos problemas.

Noticias frescas y alentadoras

Incluyo este artículo que acabamos de traducir ya que la comunidad científica mundial está sobre la ruta correcta para descubrir la cura definitiva de la enfermedad de Huntington. HAY QUE TENER FE Y ESPERANZA, ya que muy pronto tendremos lo que requerimos para mitigar nuestros sufrimientos.
Ensayos seguros son una pieza crucial en el rompecabezas para el silenciamiento de genes
Fuente: HDBuzz
Autor: Dr. Ed Wild
Editado por: Dr. Jeff Carroll
Traducido por: Víctor A. Orozco Fundación Huntington de Colombia
www.fuhcol.blogspot.com

Tres ensayos de medicamentos para "silenciar" el gen de la EH en monos muestran que dan en el blanco de manera segura. Los ensayos en humanos se harán en breve.
Las drogas de silenciamiento génico ayudan a retrasar o prevenir la enfermedad de Huntington diciendo a las células que paren de fabricar la proteína dañina. Por primera vez, un estudio ha demostrado que el silenciamiento de genes impacta en su objetivo y es seguro en los complejos cerebros de los monos rhesus.

El silenciamiento génico- discurso en ascenso
Si se le pregunta a un investigador de la enfermedad de Huntington cual es el tratamiento más prometedor en desarrollo, hay una buena probabilidad de que va a decir " el silenciamiento génico. El artículo en HDBuzz , "El silenciamiento génico: la historia hasta ahora" informa lo actual sobre el silenciamiento de genes , sin embargo , éste es un rápido resumen.
Cada célula de nuestro cuerpo contiene dos copias del gen de la EH, una heredada de cada progenitor. La enfermedad de Huntington es causada siempre por "un error de información " en la misma base de una copia del gen de la EH.
Las proteínas son máquinas químicas que hacen las cosas importantes en las células, y un gen es una receta que indica le a las células cómo fabricar una proteína.
El gen anormal de HD hace que las células produzcan una proteína anormal, lo que se llama “huntingtina mutante”. Esta proteína huntingtina mutante es la que daña las células, conduciendo eventualmente a los síntomas de la enfermedad de Huntington.
Si una casa se está inundando debido a que el baño está botando agua, la solución obvia sería la de detener el flujo. Eso es lo que la terapia de silenciamiento génico básicamente tiene como objetivo en la enfermedad de Huntington – decirle a las células que dejen de producir la proteína nociva.
Nuestros genes están compuestos de ADN y cuando una célula produce una proteína, se crea una "copia de trabajo de éste a partir de una sustancia química relacionada llamada ARN. Se puede pensar en el ARN como una copia funcional del gen, o una "molécula de mensaje".
El silenciamiento de genes involucra drogas de diseño especial que se adhieren a la molécula mensajera del HD y dicen a las células que eliminen el mensaje, en vez de usarlo para fabricar proteínas. El resultado es que se produce menos proteína dañina.
Que tanto se ha hecho con el silenciamiento génico hasta ahora?
Con el silenciamiento de genes se ha demostrado que se retrasa la progresión de los síntomas de la enfermedad de Huntington en ratones y ratas HD, dando como resultado mejoras tanto en los síntomas como en el daño cerebral, incluso después de que la enfermedad ha comenzado. Y las pruebas muestran, que una pequeña reducción en los niveles de la huntingtina mutante produce una mejora sostenida.

Hasta ahora, el silenciamiento de genes ha superado todas las pruebas necesarias y está cerca de ser ensayados nuevos fármacos en humanos con HD. Una pregunta clave que queda flotando y es si son seguros para usar.

Evaluando la seguridad de los medicamentos.
Las personas afectadas con la HD claman vehemente por cualquier droga que los ayude, aun si hay efectos colaterales, ya que serían más tolerables que sufrir la enfermedad o estar a riesgo.
Realmente, ningún fármaco es aprobado para uso humano hasta que se haya demostrado que es completamente seguro. HD es una enfermedad lenta y progresiva, y los tratamientos pueden necesitar ser administrados durante años. Los nuevos fármacos podrían tener efectos secundarios inesperados, incluso peores que los síntomas de la EH y en el peor de los casos podrían acelerar la enfermedad.
Lo que realmente importa es establecer si un fármaco es seguro para uso en seres humanos antes de iniciar los ensayos clínicos.
Por qué probar en monos?
En comparación con el cerebro humano, el cerebro de ratones y ratas es muy pequeño y más simple. Además, las drogas para el silenciamiento de genes no pasan fácilmente de la sangre al cerebro, así que tienen que ser inyectados ya sea directamente en él o en el líquido que lo rodea. Este problema se está trabajando, pero es poco probable que cambie pronto. Por ahora, es muy probable, que estos procedimientos invasivos, sean el precio que se tenga que pagar por desactivar el gen de la EH.
El silenciamiento génico es un enfoque nuevo y poderoso, por lo que es esencial que se ponga a prueba en cerebros más grandes y complejos, a fin de evaluar su seguridad de y las técnicas quirúrgicas utilizadas para llevarlo al cerebro.
Un equipo de investigadores dirigido por la Dra. Beverly Davidson de la Universidad de Iowa y McBride Jodi de la Universidad de ciencia y Salud de Oregón, es uno de varios que trabajan en materia de drogas de silenciamiento del gen de HD. El éxito de sus medicamentos en roedores les llevó a la siguiente etapa - las pruebas en cerebros de primates más avanzados - los monos rhesus, para ser precisos.
Los resultados de su investigación - el primer estudio publicado sobre seguridad del silenciamiento de los genes en HD en un primate - acaban de ser anunciados en la revista Molecular Therapy.
Los primates sólo se utilizan en investigación médica cuando no hay otra alternativa, y su uso está estrictamente regulado para asegurarse de que se utiliza un número pequeño y que son tratados lo más humanamente posible.
Las drogas
Las drogas de silenciamiento génico se presentan en dos "sabores" básicos : droga ARN de interferencia (RNAi), que se parece químicamente mucho a la molécula mensajera ( ARMm) y la droga oligonucleótido antisentido (ASO), menos similares, pero que se difunden más en el cerebro. Estos “sabores” se están estudiando al mismo tiempo por varios equipos en todo el mundo.

Otra opción para los investigadores que diseñan drogas para silenciamiento génico, es la posibilidad de dirigirse a todas las moléculas mensajeras o sólo a la proteína mutante. Dirigirse a la mutante podría ser más seguro, pero es más difícil de hacer. Una vez más, por el momento, no sabemos cuál es la mejor opción para trabajar.

Cada una de las dos copias del gen de la huntingtina en las células - una de la madre y otra del padre - se llama "alelo". Los medicamentos que se dirigen únicamente a la huntingtina mutante se llaman 'alelo-específicos ", mientras que los que se dirigen a todas las moléculas mensajeras se llaman alelo-no específicos".
Drogas Davidson para silenciamiento génico son medicamentos RNAi alelo no específicos.
Los ensayos
El equipo de Davidson eligió un blanco llamado putamen. El putamen es una estructura profunda del cerebro que es crucial para controlar el movimiento y que participa en las primeras etapas de la enfermedad de Huntington.
Para ayudar a la difusión dentro del cerebro la droga fue empaquetada dentro de un virus inactivado llamado AAV. El propósito de este ensayo no fue para mostrar que el fármaco demora la HD, sino para evaluar su seguridad. Los animales no tenían el gen anormal HD sino dos copias normales.
Se utilizaron doce monos macacos rhesus en tres grupos asi: cuatro con el virus y el fármaco, cuatro con el virus AAV y un placebo y cuatro con solución salina. Cada mono recibió seis inyecciones al mismo tiempo - tres en el putamen izquierdo y tres en el derecho.
Antes de inyectarlos sus habilidades para movimientos finos fueron evaluadas observando que tan rápido podían tomar un dulce colocado al final de una varilla de metal. Collares con sensores de movimiento fueron utilizados para medir como se movían los monos dentro de la jaula. Un examen neurológico similar al utilizado en pacientes de HD fue diseñado especialmente para detectar cualquier sutil problema de movimiento de los monos. Es importante destacar que los investigadores que realizaron las evaluaciones no sabían qué tipo de tratamiento habían recibido los animales.
La droga llegó a su destino
Seis semanas después de las inyecciones, los cerebros de los monos fueron examinados al microscopio. Los resultados fueron buenos: en los animales tratados, el cerebro alrededor de los sitios de inyección tenía alrededor de la mitad de la cantidad de moléculas mensajeras de la huntingtina, como en los monos no tratados. Fue alentador saber que había indicios de que la droga se había extendido hacia arriba y hacia abajo de las neuronas del putamen en las regiones cerebrales vecinas.

La droga fue segura
Es comprensible, todos los monos eran menos activos una semana después de la cirugía, pero los animales que recibieron el fármaco activo no estaban peor que los demás y todos se recuperaron rápidamente. Los animales tratados con la droga no tuvieron pruebas de movimiento peores durante el período de observación de seis semanas, lo que sugiere que el medicamento era seguro y no tenían señales de inflamación anormal o daño adicional en las neuronas.
Astutamente, los investigadores incluyeron una prueba extra para buscar sutiles efectos secundarios en la capacidad para aprender nuevos tareas - un trabajo clave de la putamen. Esta nueva tarea consistía en tomar el mismo dulce al final de una varilla con forma de signo de interrogación. Fue tranquilizador encontrar que los animales tratados con el fármaco fueron tan buenos como los otros en el aprendizaje de esta nueva tarea.
Hubo algún inconveniente?
Aunque el ensayo desde el punto de vista de su seguridad fue un éxito, es conveniente considerar estas dos observaciones:
1. Uno de los animales inyectados con la droga desarrolló problemas de movimiento en su pierna y probablemente fue un efecto directo de la inyección en el cerebro.
2. Aunque la droga RNAi se difundió en como se esperaba, el volumen total de tratamiento es aun pequeño para que pueda difundir a otras áreas comprometidas con la enfermedad como la corteza (superficie rugosa del cerebro). Escalar este ensayo en cerebros humanos mucho mas grandes que el de los monos es un gran desafío.
Finalmente, vale la pena repetir que esta prueba no puede decirnos si la droga realmente retrasa o previene la HD en los seres humanos - los monos en este ensayo de seguridad tenían cada uno dos copias normales del gen de la EH.
Debemos esperar un poco más los ensayos en primates
Sin embargo hay tres eventos caminando.
El trabajo de Davidson sobre el silenciamiento génico en monos es el primero publicado en una revista científica. En el reciente congreso mundial sobre la enfermedad de Huntington de Australia se supo que otros dos grupos de trabajo sobre este mismo tema con resultados satisfactorios en monos.
Un equipo de la Universidad de Kentucky, en colaboración con la compañía Medtronic, ha estudiado el alelo no específico RNAi por más de seis meses y no encontrado problemas serios de seguridad.
Mientras tanto, la farmacéutica Isis de California, anunció que la inyección de la droga ASO en el líquido de la base de la espina dorsal - un procedimiento relativamente menor - produjo una reducción del 50% en el mensaje de la huntingtina en el cerebro. Sin embargo, tenemos que esperar la publicación de los resultados de estos estudios para sacar conclusiones definitivas.


En resumen
Vienen tiempos mejores. Las drogas de silenciamiento génico ya han sido aprobadas en varias enfermedades humanas y desde hace un año se ha efectuado un ensayo con la enfermedad de la neurona motora, enfermedad neurodegenerativa similar a la HD.
En este momento, aunque esperaríamos que los ensayos en monos hubieran informado más sobre los movimientos en humanos, es reconfortante saber que las drogas llegaron a su destino y son muy seguras para un cerebro más grande y complejo.
Basados en estos logros, hay planes en marcha para pruebas de silenciamiento génico en humanos. Es probable que esto suceda dentro de dos años, en un pequeño número de pacientes voluntarios. Si las cosas van bien, seguirán ensayos más grandes hasta tener pruebas suficientes para lograr un medicamento aprobado.
Hay que tener cuidado: el camino tiene muchas vueltas y algo puede salir mal. Hasta el momento las cosas han salido bien y el silenciamiento génico es el principal candidato en la búsqueda de tratamientos para frenar la HD.

Objetivo: el gen mutante de la enfermedad de Huntington sin tocar el gen sano.

La mayoría de los investigadores de la enfermedad de Huntington están de acuerdo en que el silenciamiento de genes es el más prometedor avance en este campo, sin embargo, no saben qué tan seguro es. Un equipo canadiense ha demostrado que el silenciamiento de un alelo especifico, dirigido al mutante y dejando el gen sano funciona y es seguro en ratones HD.

Recapitulación sobre el silenciamiento de genes.

Es claro que lo que causa la enfermedad de Huntington es un "error de ortografía” en el gen que le dice a las células cómo hacer la proteína huntingtina. El gen mutante en sí no causa ningún daño: es la proteína construida siguiendo las instrucciones del gen lo que causa problemas.

Si pudiéramos decirle a las células que no produzcan la proteína nociva, en teoría, el daño que causa podría evitarse. Esa es la idea detrás de las terapias de silenciamiento de genes, también conocido como el silenciamiento de la huntingtina.

Cuando una célula utiliza un gen para hacer una proteína, el primer paso es hacer "copias de trabajo” del mismo, las cuales están hechas de una sustancia química del ADN, llamado "ARN mensajero" o mRNA. Este ARNm mensajero es el objetivo de los tratamientos de silenciamiento génico.
Los científicos pueden hacer moléculas de ADN, el ARN y sustancias químicas similares, que son precisamente diseñadas para adherirse al ARNm mensajero de la huntingtina. Cuando esto sucede, las células dejan de leer el mensaje y se detiene la producción de proteínas. De hecho, las células eliminan el mensaje. Efectivamente, esto tiene ayuda a desactivar el gen de la huntingtina y detiene la producción de la proteína nociva. Cuando la molécula de la droga está hecha de ADN, se llama un oligonucleótido anti-sentido o ASO.
Silenciando un alelo específico.
Las terapias de silenciamiento génico suenan muy atractivas en HD. ¿Por qué no ponerlas a prueba en pacientes de inmediato? Un problema es que no sabemos si es seguro desactivar el gen de la huntingtina.
Cada célula tiene dos copias de cada gen - una heredada de cada progenitor. Una sola copia de un gen se denomina alelo. En el caso del gen de la enfermedad de Huntington, el que tenga la enfermedad, o que la va a desarrollar, tiene un alelo normal - llamado alelo 'tipo salvaje' y un alelo mutante. Un alelo mutante es suficiente para causar todos los problemas de HD.
No se entiende completamente lo que hace la proteína huntingtina, pero ciertamente parece esencial para muchos aspectos de la función celular normal. La desactivación de los dos alelos del gen de la huntingtina puede ser peligrosa y podría causar más daño que bien. Así que, una opción que está siendo considerada por el silenciamiento de genes en HD es seleccionar el alelo mutante, sin tocar el alelo de tipo salvaje.
El trabajo de grupo del profesor Michael Hayden, en Vancouver, Canadá, se dirigió a cómo hacer esto y fue publicado en la revista Molecular Therapy. Para dirigirse al alelo mutante, el Dr. Jeff Carroll, y el Dr. Simon Warby del laboratorio de Hayden buscaron partes del alelo mutante que eran diferentes de los alelos de tipo salvaje.
Objetivo: el alelo mutante con SNPs
El equipo de Hayden ha hecho uso de diferentes patrones con diferencias de “ortografía” de una sola letra en la huntingtina mutante y en los alelos de tipo salvaje. Estas diferencias de una sola letra, se llaman "polimorfismos de nucleótido único" o SNPs - pronunciado "snips".
Cada uno de nosotros tiene miles de SNPs que hacen que nuestros genes sean diferentes de los de otras personas. La mayoría de los SNPs son "silenciosos" - no hacen ninguna diferencia en el funcionamiento de nuestros genes. Los investigadores tuvieron un golpe de suerte. Les resultó muy fácil distinguir entre los alelos de la huntingtina mutante y de tipo salvaje utilizando SNPs. Se encontró que 50 SNPs se observan con mayor frecuencia en el alelo mutante que en el de tipo salvaje.
A continuación, produjeron drogas ASO dirigidas a los SNPs que habían encontrado. Utilizando células de piel cultivadas en el laboratorio, evaluaron qué tan bien reconocían sus objetivos y qué tan bien suprimían el mensaje de la huntingtina mutante, preservando al mismo tiempo el mensaje para producir el alelo de tipo salvaje. Más de la mitad de los candidato ASO fracasaron en esta etapa.
La siguiente pregunta fue cómo muchos pacientes portan cada objetivo SNP. Eso es muy importante, porque si un SNP es raro, no muchos personas se beneficiarán de un tratamiento dirigido a ASO. Al hacerse esta pregunta, el equipo de Hayden, limitó la búsqueda a cuatro ASO.
Probando los ASO en la neuronas.
El siguiente paso consistíó en evaluar qué tan bien los cuatro ASO podían reducir la producción de la huntingtina mutante en las neuronas. Utilizaron neuronas de los ratones HD, criados en el laboratorio, para seleccionar las ASO de mejor desempeño. Después de hacer algunos cambios químicos para maximizar los efectos de la ASO, probaron si el tratamiento funcionaba en ratones vivos HD, cuando era inyectado en las zonas del cerebro que son los más afectados en HD. Encontraron que los ASO fueron eficaces en el bloqueo selectivo de los mensajes del alelo mutante HTT. De hecho los niveles de la proteína mutante se redujeron en un 80%, mientras que los niveles de la proteína de tipo salvaje en sólo el 3%. En los ratones, el tratamiento de ASO fue seguro y bien tolerado.
Al menos en estos ratones luce como un buen tratamiento.
Qué sigue?
La pregunta obvia es si este tratamiento puede ser una opción en humanos. El equipo de Hayden, afirma que la lista original de SNPs se redujo a los tres primeros, que fueron capaces de dirigir el alelo mutante de forma selectiva en el 85% de los pacientes en HD. Probaron que el mejor SNP está presente en aproximadamente la mitad de los pacientes en HD.
Obviamente, los ratones son bastante diferentes de los seres humanos. Uno de los retos que queda es cómo administrarles el tratamiento dentro de sus grandes cerebros. Además, el tratamiento debe darse repetidamente, debido a que viven mucho más tiempo que los ratones y los efectos pueden desaparecer.
Es posible que haya efectos secundarios en los seres humanos que en los ratones HD no se pudieron predecir - por ejemplo, la desactivación por error de otros genes que son importantes en humanos, pero no en los ratones. Otra cuestión es cómo saber si este tratamiento funciona ya que no se puede cortar en pedazos el cerebro humano para examinarlo bajo el microscopio. Por último, está la cuestión de ese 15% de pacientes que no tienen estos SNPs objetivo del ASO.
Así que, hay mucho trabajo por hacer, sin embargo, esa condición es una prueba evidente de que el silenciamiento de los genes alelo-específicos puede trabajar de forma segura en ratones HD y al menos en teoría, un pequeño número de SNPs sirve para tratar la mayoría de los pacientes. ( NR. Una droga que sirva para tratar el 85 de los pacientes sin presentar efectos indeseables, es un prodigio de la ciencia)
Evitamos ser demasiado determinantes cuando se trata de tiempo, porque algo puede salir mal en el camino; podemos mirar hacia atrás y darnos patadas a nosotros mismos por decir esto, pero HDBuzz predice que el primer ensayo de silenciamiento de genes en pacientes humanos se iniciará en los próximos dos años. Huelga decir que, todo lo que suceda va a ser leído aquí.
HDBuzz
Por Dr Michael Orth
Editado por Dr Ed Wild
Traducido por: Fundación Huntington de Colombia

Son reales las estadísticas de la enfermedad en Colombia?

Son las estadísticas de la enfermedad en Colombia iguales o mayores a las mundiales?
En la Fundación Huntington de Colombia, hemos calculado la incidencia del mal, sobre la base de las cifras referidas en trabajos de investigación mundiales que corresponden a 1 x 10000. De acuerdo a este valor y teniendo en cuenta que la población colombiana según el último censo es de 45.660.000 habitantes, el número de pacientes sería de 4.566 en todo el país ( teniendo dos núcleos grandes en los cuales la enfermedad es un problema de salud pública, ya que las estadísticas fallan; Juan de Acosta Atlántico y el Difícil Magdalena. Por otro lado, un núcleo familiar medio puede ser compuesto de cuatro individuos de los cuales el 50% está a riesgo, entonces este otro componente de la estadística nos arroja alrededor de 12.000 personas. Dado que en Colombia no existen ni en las EPS, ni en el Ministerio de Protección Social, ni en el Instituto Nacional de Salud datos ciertos de la incidencia de la enfermedad, se pueden aceptar como ciertos estos valores. Sin embargo, los últimos trabajos hechos en Inglaterra, donde el estado controla y vigila la salud de sus habitantes con mucha veracidad y certeza, la incidencia ha sido calculada entre 5-10 x 10.000 ( datos reales de incidencia calculada sobre casos tratados en el pais). Últimamente, hemos recibido muchas comunicaciones de pacientes o presuntos pacientes, lo cual parece indicar que estamos cercanos a esta cifra, pero esto es mera suposición. Queremos llamar la atención a las EPS, MPS, INS , Asociaciones Neurológicas y demás que nos ayuden a confirmar cual es la incidencia de la enfermedad en Colombia, para poder trabajar sobre hechos reales no sobre meras suposiciones.
Agradecemos a las personas que se comuniquen con la Fundación, que nos hagan saber si en su pueblo o ciudad existen más casos con o sin diagnóstico.

Terapia de silenciamiento de genes: Retos

Reto 4: Escogiendo el objetivo correcto
Los investigadores de drogas quieren detectar los problemas con anticipación y no esperar a que sucedan, y un posible problema con el silenciamiento de genes es su efecto sobre las copias del gen de la huntingtina natural o de tipo salvaje.
Sabemos que no tener la huntingtina en absoluto es peligroso. Los ratones sin ninguna copia del gen mueren antes de nacer. Así que la pregunta clave es, si la reducción de la huntingtina mutante que es necesaria para tratar la enfermedad causa reducción en el tipo salvaje de la huntingtina, es también peligrosa?
Por el momento no sabemos. Algunos investigadores consideran que sólo una pequeña disminución en la huntingtina mutante será suficiente para dar a las células la oportunidad de recuperarse, así que no necesitamos preocuparnos por los efectos perjudiciales de una ligera reducción de la proteína de tipo salvaje Otros creen que es necesario desarrollar tratamientos que solo apaguen la proteína mutante. Eso se llama silenciamiento específico de alelos - un alelo es lo que llamamos cada una de las dos copias de un gene.
Silenciar un alelo específico suena muy sensato - si podemos centrarnos en el gen mutante, y ¿por qué no lo haríamos? La desventaja es que para apuntar a una sola copia de un gen, hay que buscar en el ADN de cada paciente las diferencias “ORTOGRAFICAS”. Afortunadamente, estas diferencias son comunes, pero probablemente se necesitarían muchos fármacos diferentes que sean capaces de proporcionar un tratamiento específico a tantos pacientes como sea posible. Algunos pacientes no tienen diferencias “ORTOGRAFICAS” adecuadas a las cuales pudiera ser dirigido el tratamiento.
El debate sobre si los alelos específicos de silenciamiento son necesarios es constante, pero la buena noticia es que no vamos a tener que esperar más tiempo para una respuesta, ya que ambas técnicas se están probando en estos momentos por distintos grupos de investigadores.
Reto 5: Efectos secundarios
Los tratamientos de silenciamiento de genes aún podrían tener efectos secundarios, aunque los posibles problemas con la reducción de tipo salvaje de la huntingtina se puedan evitar.
Uno de los problemas es el llamado " efectos fuera del objetivo ", donde la molécula de la droga se adhiere a, o interfiere con, moléculas mensajeras de otros genes diferentes del de la huntingtina. Esto produciría muchos problemas. Otra cuestión es que el sistema inmune del cerebro podría terminar peleando contra las moléculas alienígenas que se bombean lo cual empeoraría las cosas.
Tenemos que tomar estos posibles efectos secundarios en serio ahora, mientras todavía estamos en la etapa de pruebas en animales. Incluso los efectos no deseados muy leves podrían ser mala noticia, sobre todo si el silenciamiento de genes termina siendo utilizado por muchos años para prevenir los síntomas en personas que han tenido un resultado positivo.
Los científicos están trabajando en producir las mejores moléculas con el menor riesgo de efectos secundarios graves, y sólo las más seguras se presentarán para los ensayos en humanos.
Cuándo, cuándo, cuándo?
La excitación que causa el silenciamiento génico está bien justificado, ya que los investigadores consideran que éste es el mejor momento para obtener resultados satisfactorios en el tratamiento de la EH. .Es evidente que hay un montón de cuestiones que despejar y aunque año tras año se ha progresado bastante muchos sugieren que puesto que no se ha encontrado nada hasta ahora, la técnica no funciona en los pacientes.
En este momento una prueba de silenciamiento génico ASO, se está llevando a cabo con pacientes de esclerosis lateral amiotrófica ( enfermedad de neurona motora) , lo cual es bueno tanto para la droga como para la bomba y los túbulos que insertan la droga donde más se necesita. Mientras tanto muchos investigadores en todo el mundo están imaginando cuáles serán las mejores moléculas para poner a prueba con pacientes de la EH.
No podemos decir con certeza, cuando estarán listos los tratamientos de silenciamiento génico para nuestros pacientes, pero el equipo de HDBuzz, estaría muy decepcionado si no vemos ensayos de este tratamiento en humanos en un futuro muy cercano.
El doctor Carol , editor de éste artículo, ha realizado investigaciones tanto con ASO como silenciamiento de alelos específicos en EH. Este artículo refleja fielmente las investigaciones realizadas.

Terapia de silenciamiento de genes: Retos

RETOS A VENCER

Reto 1: Llegar al cerebro
Uno de los principales problemas es llevar las moléculas de silenciamiento donde se necesitan. En HD, la muerte de células cerebrales llamadas neuronas es la cuestión más importante, así que necesitamos colocar la molécula dentro de ellas.
El primer obstáculo es introducir la droga en el cerebro. El cerebro tiene una barrera natural de defensa que evita que sustancias nocivas entren con la sangre. En general, es bueno para nosotros, ya que protege el cerebro, pero para los investigadores de drogas para la HD es un dolor de cabeza, ya que es mucho más difícil conseguir drogas en el cerebro que en , el hígado o los riñones.
Por lo que es poco probable que una simple tableta o una simple inyección sea conveniente en la lucha del silenciamiento de genes contra HD. Una forma de evitar este problema es el uso de bombas y tubos pequeños para perfundir el fármaco directamente en el cerebro o en el líquido que lo rodea - el líquido cefalorraquídeo o LCR. Eso suena bastante desalentador, pero no hay duda que implantando bombas o tubos en el sistema nervioso es una gran realidad , ya que similares dispositivos se utilizan para administrar medicamentos en otras enfermedades como la esclerosis múltiple (EM) y el cáncer cerebral, donde se ha obtenido un registro de seguridad muy bueno.

Reto 2: La distribución en el cerebro

Una vez la droga esté en el sistema nervioso, el problema de su distribución está aún sin resolver. El cerebro es una gran masa de tejido donde es muy difícil para las drogas de silenciamiento su diseminación. Por otra parte, el tratamiento tiene que trabajar dentro de las células y flotando o dando vueltas entre ellas no es suficiente.
Los científicos están utilizando diferentes métodos para solucionar este problema. Los ganadores del Premio Nobel utilizan moléculas de ARN de interferencia (ARNi) para desactivar genes, que son muy similares a las moléculas producidas naturalmente por las células. La desventaja es que no tienden a diseminarse naturalmente a través del cerebro, y no muy buenas en llegar dentro de las células.

Por lo tanto, los investigadores de RNAi tienden a utilizar tubos muy finos, insertados en la sustancia del cerebro, dirigidos a las regiones más afectadas, conectados a las bombas que utilizan la presión para que la droga se propague más profundamente. Otra opción es permitir que las moléculas de RNAi “cabalguen” sobre virus inactivados, que son expertos en la difusión en el cerebro y en inyectar material dentro de las células.
Otra manera es tratar con diferentes moléculas que podrían ser mejores en la difusión alrededor y dentro de las células. Los Oligonucleótidos antisentido (ASOs) son similares a las moléculas de RNAi, pero son un poco más sencillos y no los producen naturalmente las células. El principio es el mismo - se adhieren a la molécula mensajera ARNm y previenen a la célula sobre su uso para construir proteínas.

Los ASOs parecen ser mucho mejores para difundir por todo el cerebro, además pueden entrar en las células con bastante facilidad. También parece que duran mucho más tiempo - lo que podría ser algo bueno o malo, dependiendo de lo bien que hagan su trabajo.

Reto 3: Desactivación del gen

La prueba clave de un tratamiento de silenciamiento de genes, es si se puede desactivar el gen con éxito. Hasta ahora, la investigación en modelos animales con HD ha sugerido con bastante énfasis, que esto se puede lograr, con ambos tratamientos: RNAi y ASO.

En 2005, un equipo de investigadores dirigido por Bev Davidson en Iowa inyectó moléculas de ARNi en cerebros de los ratones con HD logrando reducir el mensaje de la huntingtina en 85% La función motora y alteraciones celulares también mejoraron. Desde entonces, varios grupos de investigadores han reportado éxito en la reducción de la producción de la huntingtina con varias moléculas diferentes, incluidos los medicamentos RNAi y ASO. El trabajo más reciente sugiere que los beneficios de las infusiones, incluso las cortas, se mantienen durante períodos bastante largos.

Silenciando el gen de la Huntingtina. Parte I

Me permito incluir la primera entrega de este reciente artículo que tiene una carga de esperanza para nuestros pacientes y que trata sobre una novedosa e ingeniosa tecnica para desactivar el gen que produce la Huntingtina mutada causa de esta devastadora enfermedad.

Silenciamiento génico para HD: la historia hasta ahora.
http://en.hdbuzz.net/23

Es el silenciamiento de genes tan emocionante como suena para HD, y que le depara el futuro? By Dr Ed Wild on March 22, 2011 Edited by Dr Jeff Carroll.

El silenciamiento génico consiste en utilizar moléculas diseñadas especialmente para 'apagar' el mensaje que hace que las células produzcan la proteína huntingtina mutada o perjudicial. Nuestro primer HDBUZZ sobre silenciamiento de genes, explica las técnicas, los resultados hasta ahora y los nuevos desafíos.
Hemos tenido muchas peticiones de los lectores para que escribamos un artículo sobre "el silenciamiento de genes '- también conocido como" el silenciamiento de la huntingtina. Esta es un área de investigación que genera gran excitación en nuestros usuales lectores. La atención de muchas personas ha sido dirigida al tema, debido al reciente comunicado de prensa conjunto entre Lundbeck y la Universidad de Massachusetts, al anunciar una colaboración en la investigación destinada a desarrollar la "interferencia del ARN (ARNi)" terapias de alta definición.
Así que, ¿Qué es el silenciamiento de genes? ¿Cómo funciona y cómo podría beneficiar a los pacientes de HD? Muchos investigadores creen que el silenciamiento génico es nuestra mejor oportunidad para producir con éxito tratamientos de alta definición en un futuro próximo.
Los genes, los mensajes y las proteínas.
Las proteínas son moléculas que actúan como pequeñas máquinas, llevando a cabo la mayor parte de su valiosa labor dentro de las células - cosas tales como hacer que las reacciones químicas funcionen, comunicar de mensajes o dar estructura a las células, etc. Cada proteína es fabricada usando un conjunto de instrucciones contenidas en un gen. Los genes están hechos de ADN, y viven en el centro de control de la célula, el núcleo.
Los genes no acostumbran hacer las proteínas directamente, aunque en el medio, la célula utiliza la secuencia de ADN del gen como una plantilla para hacer "el ARN mensajero" llamado "molécula de mensaje 'o ARNm. La molécula de ARNm mensajera, es utilizada para decirle a la célula que construya bloques que se mantengan unidos para hacer la proteína.

En resumen, el ADN se utiliza como plantilla para hacer un mensaje de ARNm, y la molécula mensajera, se utiliza para construir las moléculas de proteína.

La enfermedad de Huntington es causada por un solo gen anormal - el gen que le dice a las células que produzcan la proteína llamada huntingtina. Cada célula tiene dos copias de cada gen. La mayoría de las personas con HD, o aquellas que la desarrollan tardíamente, tienen un gen "normal" y uno donde se repite mucho la secuencia de tres letras de "CAG" cerca del comienzo. '"Así de simple el “Error ortográfico” resulta en una "proteína mutante” que se comporta de forma diferente a la proteína normal, dañando las células y produciendo los síntomas de la HD. Es posible que haya oído el término "tipo salvaje" o mutantes y aquello que los científicos llaman genes y proteínas no-mutantes, o «normales ».

Silenciando el gen de la huntingtina.
Dado que el gen anormal es la causa de todos los problemas en HD, ¿por qué no deshacerse de él y reemplazarlo con un gen sano? Desafortunadamente eso es poco probable que funcione, porque las células tienen una manera muy segura de proteger el ADN para evitar daños o alteraciones. La molécula de ARNm mensajera, por el contrario, está flotando dentro de la celda, y mientras está allí, va a seguir siendo utilizada para hacer más moléculas de proteínas. De alguna manera se podría decirle a la célula que ignore mensaje, entonces la proteína dañina no se produciría. Esa es la idea detrás de "silenciamiento génico". La idea es que los científicos podrían crear un medicamento que es en realidad una molécula mensajera, especialmente diseñada, que se adhiere al mensaje de la huntingtina y le dice a la célula que se deshaga de ella.
El silenciamiento génico suena demasiado bueno para ser verdad, pero lo es. En 1998, dos investigadores, que ganaron el Premio Nobel de Medicina, trabajaron en la forma de desactivar genes individuales. Llamaron a su técnica ARN de interferencia (ARNi). El silenciamiento génico es actualmente una técnica estándar usada por los científicos para estudiar cómo funcionan los organismos, cómo causan daño las enfermedades y como una manera de desarrollar tratamientos. Un medicamento de silenciamiento génico (Vitravene, utilizado para tratar una infección vírica del ojo) está autorizado para uso humano, y hay más de una docena de ensayos en curso en muchas enfermedades diferentes, con expectativas de ampliar su número. Si fuera tan fácil como eso, tendríamos pastillas de silenciamiento génico para la enfermedad de Huntington ya, así que ¿cuál es el truco? Bueno, como con cualquiera nueva técnica son inevitables los desafíos, reveses y obstáculos inesperados en el camino.

Frentes de trabajo en la enfermedad de Huntington

Actualmente los científicos dedicados a correr el velo que cubre la enfermedad, dirigen sus estudios hacia los siguientes campos de la ciencia:
NEUROBIOLOGIA BASICA:estudios sobre el gen de la HD para entender mejor qué causa la enfermedad.
IMAGENES DIAGNOSTICAS:PET scaning y otras tecnologías.
MODELOS ANIMALES: ratones, mosca de la fruta y otros, utilizados para descubrir las causas, probar medicamentos, diseñar modelos de investigación y otros.
INVESTIGACION EN TEJIDOS FETALES: implantación de tejidos fetales en roedores y primates no humanos para restablecer o reemplazar funciones perdidas por degeneración nerviosa en los enfermos de HD.
ESTUDIOS GENÉTICOS: continúan estudiando modelos de herencia en familias incluyendo estudios genéticos de edad de presentación, modelos de herencia y marcadores encontrados dentro de familias, para dilucidar como pasan estas anomalías entre generaciones.
ENSAYOS CLINICOS DE MEDICAMENTOS: clases de medicamentos que controlan los síntomas, demoran la rata de progreso de la enfermedad, corrigen o reemplazan defectos metabólicos que contribuyen al desarrollo y progreso de la enfermedad.

Fármacos antinausea usadas en HD

El Dr. Jeff Carrol en su nota del 04.02 11, comunica que el fármaco MECLIZINE, usado para tratar las náuseas, tiene un efecto reparador sobre las células mutadas en HD. Previenen la muerte celular reduciendo la producción de energía. Aparentemente esto sería una contradicción, ya que la energía es un problema en la HD, siendo uno de los principales sintomas de la enfermedad la acelerada pérdida de peso; sin embargo, se conoce poco de cómo y porqué sucede esto ya que los pacientes comen mas que una persona normal, pero toman mas tiempo en ganar peso. Parece ser que el problema no es consumir muchas calorías, sino cómo usa la energia que consume.
Apenas ahora, los científicos han comprendido que el papel de la huntintina normal es regular la producción de energía dentro de la célula, la conexión entre largas repeticiones CAG y la baja produccion de energia.
La Meclizina, protege las células de la muerte celular y lo hace ralentizando su metabolismo. Este hallazgo fue sorpresivo para el Dr. Brent Stockwell quien trabajaba buscando fármacos que previnieran a muerte celular en HD encontró que aquellas que bajaban el metabolismo celular hacía mas saludables las células mutadas de HD.
MECLIZINE es el nombre genérico de productos tales como el Dramamine, usado para prevenir náuseas y en problemas de oido interno. N del E.

Segunda parte del testimonio anterior. Rick Rood

Había muchas actividades divertidas que brindaba el personal de la clínica, incluyendo voleibol con globos (que parecía disfrutar mucho Polly), cenas para fiestas especiales (ella solía vestirse con su mejor vestido y me acompañaba por el pasillo hasta el comedor), salidas a varios eventos en la ciudad (por ejemplo, conciertos, la feria estatal). En realidad, cuando Polly ingresó en la clínica su vida mejoró de muchas formas. Porque el año anterior a su mudanza, prácticamente todo nuestro tiempo estaba dedicado a "mantener la cabeza fuera del agua" (cosa que no siempre lográbamos hacer). Empezábamos a hundirnos bajo el peso de todas las actividades necesarias solo para mantener nuestra vida. Pero, con toda la ayuda del personal de la clínica para cubrir muchas de estas cosas, el tiempo que pasamos juntos ahora podía dedicarse a otras cosas que mejoraban la calidad de vida de Polly.
Durante varios años, siempre llevaba a Polly a casa los fines de semana, y siempre programaba una salida especial o dos, a un juego de béisbol, un concierto, una película, un paseo por el lago, etc., etc. Encontré que la anticipación de estos eventos ofrecía un elemento de esperanza y gozo a Polly durante las largas semanas en la clínica. Todos necesitamos esperanza, aun las pequeñas esperanzas de un cambio de ritmo en cada fin de semana. Recuerdo bien un día, tal vez ocho o nueve años atrás, cuando Polly me miró y dijo en su lenguaje confuso de entonces: "Rick, tú ayudas a que mi vida valga la pena". Que yo le diga a usted esto parece egoísta, y tal vez lo sea. ¡Pero le diré que esa declaración permaneció en mi corazón durante muchos años! En otra ocasión, recuerdo que le pregunté a Polly cómo ella seguía adelante a pesar de las dificultades que eran a veces abrumadoras. Simplemente me dijo: "Tengo al Señor. Y tengo a mi familia".
Unos seis años atrás, se le hizo muy difícil a Polly seguir comiendo, así que decidió permitir a un médico insertarle un tubo de alimentación en su estómago. Durante un tiempo seguí trayendo a Polly a casa los fines de semana. Sin embargo, con la alimentación por el tubo cada cuatro horas, ninguno de nosotros conseguía dormir mucho, y el domingo a la noche ambos estábamos exhaustos. Pero aun después de discontinuar sus visitas la casa por estos períodos largos, seguíamos saliendo los viernes por la noche (principalmente a juegos de béisbol de escuelas secundarias) y los sábados por la tarde, y aun a la iglesia los domingos por la mañana (donde nos sentábamos atrás del santuario). Estas salidas me daban mucha alegría. Y era tan satisfactorio ver a Polly sonriendo, aun cuando apenas podía hablar ya.
La condición física de Polly estaba declinando bastante rápido ahora. Y se estaba volviendo mucho más difícil llevarla a lugares. Recuerdo bien un día, creo que cuatro años atrás, cuando me di cuenta de que ese sábado en particular sería probablemente la última vez que podría sacarla. Así fue. Desde ese día en adelante, Polly raramente salió de su cama, excepto cuando la llevábamos a la sala de la ducha. De ahí en más, se volvió una cuestión ya no de llevarla a los lugares que disfrutaba sino de traerle alegría a Polly en su habitación. Si bien continuamos muchas de nuestras rutinas diarias, me parecía que la adoración se convertía cada vez más en nuestra actividad más significativa. Polly ya no podía hablar, y yo no soy ningún gran músico. Pero podía darme cuenta de que la música de adoración que escuchábamos frecuentemente le daba una gran consolación . . . y a mí también. De hecho, en los últimos años fue la adoración lo que me dio más consolación y gozo a mi propio corazón como cuidador y esposo de Polly . . . hasta el último día de su vida. Justo antes de dejarnos ella, estaba preparándome para tocar una canción. Nunca llegué a hacerlo. ¡Pero estoy convencido de que ella fue recibida en el cielo con música muchísimo mejor y con una adoración mucho más significativa que todo lo que yo le pudiera brindar!
Al reflexionar cada vez más sobre estos últimos veinte años, me he hecho muchas preguntas. Era solo natural, especialmente al principio, preguntar "¿Por qué?". Pero sabíamos que vivimos en un mundo caído, y ninguno de nosotros puede pretender inmunidad de las luchas y aun las tragedias de la vida. Nunca pasó por mi mente, en realidad, preguntar "¿Qué?". Es decir, "¿Qué haré como esposo de Polly?". Sabía que estaba con ella "para todo el viaje". No importa qué pasara. Pero sí pregunté a veces "¿Cómo?", "¿Cómo haremos esto?". ¿Cómo la cuidaré, criaré a nuestros dos hijos, seguiré en un ministerio de tiempo completo, y por unos pocos años durante esta experiencia ayudar a cuidar a mi madre, que sufría de la Enfermedad de Alzheimer, y mi padre, cuando se enfermó tan seriamente como resultado de trabajar tan duramente por cuidar a mi madre? Y no me llevó mucho tiempo darme cuenta de que, fuera del Señor, no había forma en que podría hacerlo. Era una tarea imposible. Pero también sabía que no estamos "fuera del Señor". Él había demostrado ser fiel a nosotros de muchas formas a lo largo de los años. No podría dejar de serlo ahora.